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基于靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析


發(fā)布時(shí)間:2023-07-19 15:40:14     人氣:1649

靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增(TNEA)是一種利用靶標(biāo)分子觸發(fā)核酸編碼的擴(kuò)增反應(yīng),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)靶標(biāo)分子的放大檢測(cè)的方法。TNEA可以與熒光探針、納米材料、生物傳感器等結(jié)合,形成高靈敏度和高特異性的檢測(cè)平臺(tái),用于檢測(cè)各種生物分析目標(biāo),如細(xì)菌、病毒、蛋白質(zhì)、核酸等。

基于靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析是指利用TNEA技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)多種 mRNA 的同時(shí)檢測(cè)和定位的方法。mRNA 是一種攜帶遺傳信息的核酸分子,參與蛋白質(zhì)的合成和調(diào)控。mRNA 的表達(dá)水平和分布模式與細(xì)胞的功能和狀態(tài)密切相關(guān),因此對(duì) mRNA 的精準(zhǔn)成像分析對(duì)于揭示細(xì)胞的生物學(xué)機(jī)制和疾病診斷具有重要意義。

基于靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析相關(guān)的案例:

TNEA技術(shù)的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析方法,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)四種 mRNA c-Myc, Klf4, Oct4 Sox2)的同時(shí)檢測(cè)和定位。該方法利用四種不同顏色的熒光探針(FAM, Cy3, Cy5 Cy7),分別與四種 mRNA 的互補(bǔ)序列結(jié)合,并通過(guò)TNEA反應(yīng)產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光信號(hào)。通過(guò)熒光顯微鏡觀察,可以清晰地區(qū)分出四種 mRNA 在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平和分布模式,并發(fā)現(xiàn)它們?cè)谡<?xì)胞和癌細(xì)胞中有顯著差異。

基于DNA雜交鏈反應(yīng)(HCR)和量子點(diǎn)(QDs)的多重核酸成像方法,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)三種 mRNA (β-actin, GAPDH survivin)的同時(shí)檢測(cè)和定位。該方法利用三種不同顏色的QDs(紅色、綠色和藍(lán)色),分別與三種 mRNA 的互補(bǔ)序列結(jié)合,并通過(guò)HCR反應(yīng)產(chǎn)生長(zhǎng)鏈DNA,從而放大熒光信號(hào)。通過(guò)熒光顯微鏡觀察,可以清晰地區(qū)分出三種 mRNA 在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平和分布模式,并發(fā)現(xiàn)它們?cè)谡<?xì)胞和癌細(xì)胞中有顯著差異。

參考文獻(xiàn):

[1]Target-Triggered Nucleic Acid Encoding Amplification for Multiplex mRNA Precise Imaging Analysis.

[2]Multiplexed imaging of nucleic acids in living cells using DNA hybridization chain reaction and quantum dots.

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